学术成果 | 术前CTC可指导胆囊腺癌患者手术及术后诊疗策略制定

导语

胆囊癌(GBC)是胆道中胆囊腺癌的主要病理类型，是胆道最常见的恶性肿瘤类型，是消化道第六大最常见的恶性肿瘤类型^[1]。早期诊断和根治性切除是胆囊腺癌最有效和首选的治疗方法，可提高患者的长期生存率。然而，大多数患者在晚期才被诊断出来，只有15-47%的患者有机会接受切除^[2]，预后较差。此前的一项研究报道，胆囊腺癌的中位生存时间仅为6个月，总体5年生存率不超过5%^[3]。大多数患者最终死于肿瘤转移。

循环肿瘤细胞(CTC)是肿瘤转移的根源，与肿瘤复发转移密切相关，作为液体活检的首选样本，为监测肿瘤转移、评估治疗反应和预后提供了一种方便、有效的方法。在许多其他癌症中，外周血中CTC的计数已被证明是肿瘤患者的独立预后指标，但在胆囊腺癌中鲜有报道，由于缺乏可靠的数据来指导手术决定、评估切除病例的疗效和监测预后，胆囊腺癌需要探索更多实时、精准、便捷的监测手段。

近日，中南大学湘雅二医院普外科研究人员基于CanPatrol^® CTC分型检测技术平台，探索循环肿瘤细胞(CTC)对胆囊腺癌切除后患者预后的影响。

研究发现，通过CanPatrol^® CTC分型检测技术同步实现了CTC检测和分子分型，结果显示CTC阳性是胆囊腺癌切除术后预后不良的独立预测因素，术前检测CTC为制定胆囊腺癌患者的治疗策略提供了有价值的信息^[4]。

● 研究题目：CTC可作为胆囊腺癌预后不良的新指标

● 发表期刊：Ann Surg Oncol.

● 合作单位：中南大学湘雅二医院

● PMID：37635189

01 纳入人群

该研究纳入2018年1月至2021年1月期间133例胆囊腺癌患者，排除标准为：

(1) 除胆囊腺癌以外的恶性肿瘤病史；

(2) 与胆囊腺癌无关的死亡原因；

(3) 无随访资料。

需要手术的患者纳入到手术组，接受股息治疗的患者纳入非手术组。

▲ 研究人群特征图

02 研究方法

采用CanPatrol^® CTC可视化液体活检平台对外周血中CTC进行分离鉴定及EMT分型分析。该技术采用不依赖特定标志物的纳米膜分离方法，全面富集所有类型的CTC及CTC细胞团；通过多重mRNA荧光原位杂交法，即使用多组上皮、间质和CD45探针，同步实现CTC的EMT分子分型。

03 数据收集和随访

除CTC计数外，还记录了以下数据：性别、年龄、CA19-9水平、总胆红素、CT或mri扫描上的肿瘤大小、肿瘤分化、淋巴和血管扩张、远处转移、AJCC(V8)16 TNM分期、R0根治性切除、辅助化疗、胆囊结石。每3个月随访观察一次。常规检查临床状态、CA19-9水平及超声检查，观察复发情况。如果怀疑有复发，则进行CT和MRI检查以确定复发情况。主要目标是癌症特异性生存期(CSS)：诊断日期和因癌症导致的死亡日期之间的时间间隔。次要目标是无病生存期(DFS)：手术日期和复发日期之间的时间间隔。

04 研究结果

1 CTC检测及患者病理特征

在本研究中，CTC的总体阳性率为19.80%(20/101)。CTC阳性患者的临床参数如图所示，手术组的CTC阳性率为13.64%(12/88)，非手术组的阳性率为61.54%(8/13)。

▲ CTC阳性患者的临床特点

2 CTC状态与生存相关性

手术组仅有2例CTC阳性患者处于II期，阳性患者数量较少，无法进一步分析。因此对手术组其余III期患者进行进一步分析，结果显示与CTC阳性患者相比，CTC阴性患者的中位CSS(9.5个月VS 5.0个月，P<0.001)和DFS(5.0个月VS 2.8个月，P<0.001)，明显延长。非手术组也出现了类似的结果，与CTC阳性患者相比，CTC阴性患者的中位CSS更长(6.5个月VS 3.5个月，P=0.0031)。手术组II-III期CTC阳性患者CSS相似(P=0.67)。

▲ 根据CTC的状态得出的生存曲线

A:手术组III期CTC阳性和CTC阴性患者CSS曲线；B:手术组III期CTC阳性和CTC阴性患者DFS曲线；C:非手术组CTC阳性和CTC阴性患者CSS曲线；D:手术组II-III期CTC阳性患者和非手术组患者CSS曲线

手术组7例III期仅1例CTC，分别进行分析。此外，结果显示，CTC阴性患者的中位CSS(9.5个月VS 5.5个月，P<0.001)和DFS(5.0个月VS 2.8个月，P<0.001)。

▲ 根据手术组CTC得出的生存曲线

A:III期患者CTC阳性(CTC=1)和CTC阴性患者的CSS曲线；B:III期患者CTC阳性(CTC=1)和CTC阴性患者的CSS曲线

3 影响因素的单变量与多变量分析

在单因素分析中，手术组患者CSS差的预测因素为CTC阳性(P<0.001)、CA19-9≥200 kU/l(P<0.001)、总胆红素≥50µmol/l(P<0.001)、肿瘤大小≥2 cm(P<0.001)、肿瘤分化差(P<0.001)、淋巴膨胀(P<0.001)、AJCC III期(P<0.001)、无R0切除(P<0.001)、不加辅助化疗(P<0.001)等。因此，研究将这些变量纳入多变量分析，结果显示术前检测CTC仍然是不良预后的独立危险因素(HR 0.066,95% CI 0.021–0.206，P<0.001)。

▲ 手术组患者CSS预后不良危险因素的单因素和多因素分析

05 研究结论

在本研究中，胆囊腺癌切除后患者术前发现CTC与较短的中位CSS和DFS之间有很强的相关性。即使是术前仅检测到1例CTC的患者，手术组的中位CSS和DFS也明显短于III期CTC阴性患者。结果显示，CTC的存在对胆囊腺癌切除后的患者有明显的不良预后影响。CTC阳性患者与CTCs阴性患者相比，中位CSS和DFS更短；此外，有趣的是手术组CTC阳性患者与非手术组晚期患者的生存时间相似，说明即使CT或MRI上未发现血管扩张和/或远处转移，术前CTC阳性患者也应谨慎进行手术切除。

综上所述，术前发现CTC是胆囊腺癌切除后预后不良的独立危险因素。CTC阳性患者在切除后没有获得生存获益。因此，术前检测CTC可能对制定胆囊腺癌患者的手术及术后治疗策略具有重要的指导作用。

参考文献：

1.Kanthan R, Senger JL, Ahmed S, Kanthan SC. Gallbladder cancer in the 21st century. J Oncol. 2015;2015:967472.

2.Kam AE, Masood A, Shroff RT. Current and emerging therapies for advanced biliary tract cancers. Lancet Gastroenterol Hepatol. 2021 Nov;6(11):956-969.

3.Levy AD, Murakata LA, Rohrmann CA Jr. Gallbladder carcinoma: radiologic- pathologic correlation. Radiographics. 2001; 21: 295-314; questionnaire, 549–555.

4.Yan C, Xiao Y, Zhang W, et al.Circulating Tumor Cells are an Independent Risk Factor for Poor Prognosis in Patients with Gallbladder Adenocarcinoma. Ann Surg Oncol. 2023 Dec;30(13):7966-7975.